分枝杆菌检测
分枝杆菌检测
INNO-LiPA MYCOBACTERIA v2
一、临床背景
分枝杆菌,是结核病的病原体。结核病是一种慢性传染病,可累及全身多个脏器,但以肺部最为常见。流行病学调查显示40年代死亡率在200/10万以上,是各疾病死因之首,70年代死亡率降至30/10万,死因降至第6至7位。最近几年,我国的结核发病率又有抬头趋势。传染源主要是排菌的肺结核患者,通过呼吸道传播。结核菌侵入人体后引起炎症反应,其基本病变主要有渗出、变质和增生三种。临床表现为咳痰、午后低热、乏力、盗汗等。抗结核化疗原则:早期、连用、适量、规律和全程用药,药物有异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、链霉素、乙胺丁醇等。
二、试剂用途
INNO-LiPA MYCOBACTERIA v2可以在一个检测条带上确诊检测出培养物(液体或固体)中分枝杆菌属及16种分枝杆菌菌种。
三、检测原理
基于反向杂交的原理。生物素标记的DNA扩增产物,与以平行线形式固定在薄膜检测条上的特异性寡核苷酸探针杂交。杂交后,未能杂交的DNA从检测条上被洗脱。加入标记有碱性磷酸酶的链霉抗生物素蛋白(链亲和素),与杂交产物上标记的生物素结合。随后加入BCIP/NBT底物显色。
四、检测特点
1.INNO-LiPA MYCOBACTERIA v2具有高灵敏性。一支检测条具有多条探针,一次性同时检测分支杆菌属及其16个种。
2.16S-23S rRNA特异性区域使得鉴别分枝杆菌种属的分子实验具有高精确性。
3.轻松鉴别分枝杆菌的混合株。可以识别M. kansasii1, 2 与M. chelonae亚种。
4.可应用于早期液体培养 — 无需克隆形态学。
5.快速普查分枝杆菌大型种群。
6.手工操作简单快速,INNO-LiPA MYCOBACTERIA v2同时适用INNO-LiPA 48全自动反应仪。
7.重复性高,肉眼直观判断结果。
五、检测步骤及时间
主要步骤 |
检测时间 |
1、杂交 |
30分钟 |
2、冲洗 |
10分钟 |
3、显色 |
60分钟 |
※ 扩增后总检测时间不超过2小时。