结核分枝杆菌与利福平相关的耐药性检测-派胜医药

检测试剂

结核分枝杆菌与利福平相关的耐药性检测试剂

结核分枝杆菌与利福平相关的耐药性检测

INNO-LiPA RiF. TB

一、临床背景

结核分枝杆菌，是结核病的病原体。结核病是一种慢性传染病，可累及全身多个脏器，但以肺部最为常见。流行病学调查显示40年代死亡率在200/10万以上，是各种疾病死因之首，70年代死亡率降至30/10万，死因降至第6至7位。最近几年，我国的结核发病率又有抬头趋势。传染源主要是排菌的肺结核患者，通过呼吸道传播。结核菌侵入人体后引起炎症反应，其基本病变主要有渗出、变质和增生三种。临床表现为咳痰、午后低热、乏力、盗汗等。实验室检查：痰涂片+培养、影像学检查及结核菌素试验。抗结核化疗原则：早期、连用、适量、规律和全程用药，药物有异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、链霉素、乙胺丁醇等。

二、试剂用途

INNO-LiPA RiF. TB可以检测结核杆菌，并可检测以多药物抵抗株为标志的、与利福平耐药相关的结核杆菌rpoB基因突变。

检测条上包括：5条检测敏感基因型的探针（s1-s5）和4条检测耐药基因型的探针（R2，R4a，R4b，R5）。若缺少1条或更多的敏感基因型的探针显色带，或者伴随出现1条或更多的野生型探针显色带，被判断为其对利福平耐药。

三、检测方法及原理

INNO-LiPA RiF. TB是基于反向探针杂交的原理。来自于rpoB基因的生物素标记的DNA扩增产物，与以平行线形式固定在薄膜检测条上的特异性寡核苷酸探针杂交。杂交后，未能杂交的DNA从检测条上被洗脱。加入标记有碱性磷酸酶的链霉抗生物素蛋白（链亲和素），与杂交产物上标记的生物素结合。随后加入BCIP/NBT底物显色。

四、检测特点

1．便捷性：INNO-LiPA RiF. TB与利福平相关的耐药性检测试剂，同一检测条可同时检测出结核杆菌的敏感性及其对利福平的耐药性。

2．敏感性：可准确检测结核杆菌种群；在利福平的耐药性未出现时，可超前检测患者即将表现出的对利福平的耐药性。

3．特异性：确定rpoB基因是与利福平耐药性相关的突变。

4．快速简单：检测时间短，操作简单，肉眼直观判断结果。

5．重复性高，易质控、标准化操作。

五、检测步骤及时间

	主要步骤检测时间
1、杂交	30分钟
2、冲洗	10分钟
3、显色	60分钟

※扩增后总检测时间不超过2小时。